为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可见的混浊物。这些沉淀的产生不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。如何避免沉淀物的产生?我们建议您在使用血清的时候,注意下列操作:•解冻血清时,请按照上述逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时温度变化太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。•解血清时,请随时轻轻地将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。•请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,青岛牛血清厂家直销,影响血清的质量。•血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,青岛牛血清厂家直销,无需做此步骤。•若必须做血清的热灭活,请遵守56℃、30分钟的原则,青岛牛血清厂家直销,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。在猪场生产中,对于血清学检测结果进行正确地分析,有助于获取有效的猪群信息。青岛牛血清厂家直销
在准备血清和其他试剂时,选择极低的内毒1素(jinliang≤1EU/ml),对实验至关重要;4.原代培养、杂交瘤融合、细胞转染,或者肝细胞、神经细胞、内皮等难养细胞的扩增,这些都需要挑选好的血清给细胞以有力支持。因此,挑选更低的内毒1素,是保证实验顺利的每一步。5.实验室有些细胞,需要长期培养、长期冻存,或者经常复苏、经常培养的,血清会经常或长时间作用于细胞。为保证细胞的健康,都应该选用更低内毒1素的血清,以避免内毒1素长久对细胞的毒性影响。青岛羊血清品牌血清的保质期是5年,储存温度-10 ~ -30℃。
马血清可增强猪单性生殖胚胎植入前,胚层的发育。有研究通过对比不同血清和血清样物质,对猪单性生殖胚胎植入前发育的影响,寻找适合其发育的培养基。对单性生殖胚胎进行猪滤泡液(PFF)、胎牛血清(FBS)、马血清(HS)或猪血清白蛋白(PSA)处理,培养2天后。通过囊胚形成和孵化,发现马血清是增强胚层发育的很有效蛋白质来源。接下来,使用三种不同浓度的HS(10%,20%和30%)来确定改善猪单性生殖胚胎发育所需的适宜HS浓度。所有HS浓度均增加了囊胚细胞数量,降低了囊胚凋亡细胞的发生率,其中20%效果更明显。
关于热灭活胎牛血清不推荐热灭活。热灭活一般是指在做免疫相关的试验中,通过加热灭活掉血清中的补体,以避免对免疫试验的影响。在胎牛血清中,由于胎龄原因,尚未形成完整的补体系统,因此,胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。并且,热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减,进而影响细胞培养效果。若针对某些特殊试验,对于胎牛血清一定要做热灭活,国际上推荐热灭活的方法:40℃水浴,20min。有下列情况者,对血清内应格外留意筛选:1.干细胞:干细胞对内非常敏感,如果血清中内≥3EU/ml时,干细胞很容易死亡。选择质量血清非常重要2.免疫细胞时:,过高的内可诱导免疫细胞释放炎症因子,抑制小鼠红细胞集落的形成等。3.基因敲除相关的细胞实验,培养的细胞要尽可能保持其原始状态,任何引导细胞衰老或凋亡的试剂,都会让后续的实验结果“失之毫厘,谬以千里”。采集血液样品后,倾斜30-45度角放置好。
如何解冻血清?血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻,这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。需要对新买的血清进行过滤吗?血清在ISO13485认证的厂房中生产,经过3次0.1μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常低。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。因此买来的血清不需要再次进行过滤。在对细胞和活疫苗进行支原体检验中,《兽药典》也明确推荐了猪血清作为支原体检验用液体培养基的组成成分。青岛猪血清生产厂
在微生物的培育中要为培育的微生物供给成长因子。青岛牛血清厂家直销
血清检测意义通过对免疫猪群进行抗体水平检测,及时了解和跟踪猪群免疫抗体水平,从而制定和调整免疫程序,对指导生产、控制疫病起着至关重要的作用。血清采集及保存1、血样采集:用于检测抗体的血清样品,可用一次性注射器采集。一般,仔猪、保育猪采用前腔静脉采集血,生长育肥猪、哺乳母猪和种公猪采用前腔静脉或者耳静脉采集血。采集血量一般3-5mL左右。注意血清中不要混入红细胞,常见有血清呈深红色,这是血清中混入了红细胞并发生破裂之故,这可使一些检测结果不准。2、血样处理与保存:所采集血样通过离心,分离出的血清保存在1.5mL离心管中。血清如一周内送检,则可冷藏于4℃冰箱,若采集血后超过一周送检,则放-20℃冻结保存,注意直至送检前不要再融化。若猪场无离心机的,可选择在室温条件下倾斜45°放置,保证静置30min(避免阳光直晒),严防发生溶血,用泡沫塑料、冰袋等材料进行包装转运至实验室进行血清分离。青岛牛血清厂家直销
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