为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可见的混浊物。这些沉淀的产生不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。如何避免沉淀物的产生?我们建议您在使用血清的时候,注意下列操作:•解冻血清时,请按照上述逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时温度变化太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。•解血清时,请随时轻轻地将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。•请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,影响血清的质量。•血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,无需做此步骤。•若必须做血清的热灭活,请遵守56℃、30分钟的原则,并且随时摇晃均匀,青岛胎牛血清采购平台。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,青岛胎牛血清采购平台,青岛胎牛血清采购平台,都会造成沉淀物的增多。长期保存血清必须在-10℃以下储存,并避免反复冻融。青岛胎牛血清采购平台
不管是国产还是进口血清,都是不测的(无四环素胎牛血去除外)。国外,的使用很严格,用量也很少,每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含或含量极低;国内,的滥用已成了普遍现象,血清中残留很高,对细胞培养极为不利,这是国产血清质量差的根本原因。血源市场上的血清血源主要分为中国、北美、南美和澳洲。1、国产血清质量差,这是公认的,主要原因并不是生产厂家的责任,而是天然环境差和的大量使用。国内环境污染严重,同时饲养过程中极其滥用,有毒有害物质会大量残留在血清中,比较终不利于细胞的生长。2、南美血清,来源很多,如Bioind的巴拿马、Gibco的乌拉圭、巴西等,这些血清由于采集血的不可控性,质量参差不齐,当然,相对于国内血清来说好的多。另外,国内销售的南美血清大多颜色鲜红,如Sera Pro、Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,这可能和各国的采集血、生产工艺有关。青岛新生牛血清生产商合格的血清产品,需要严格控制采集血时间点,才能保证比较基本的血清质量--山东云海生物。
在准备血清和其他试剂时,选择极低的内毒1素(jinliang≤1EU/ml),对实验至关重要;4.原代培养、杂交瘤融合、细胞转染,或者肝细胞、神经细胞、内皮等难养细胞的扩增,这些都需要挑选好的血清给细胞以有力支持。因此,挑选更低的内毒1素,是保证实验顺利的每一步。5.实验室有些细胞,需要长期培养、长期冻存,或者经常复苏、经常培养的,血清会经常或长时间作用于细胞。为保证细胞的健康,都应该选用更低内毒1素的血清,以避免内毒1素长久对细胞的毒性影响。
如何避免沉淀物的产生?建议您在血清使用的过程中,采用正确的解冻方法(冷冻→4℃→室温),若血清解冻时改变的温度太大(如冷冻→37℃)非常容易产生沉淀物。温度过高、时间过久、摇晃不均匀等,都会造成沉淀增多,我们建议如非必要无须对血清进行灭活;若必须热灭活,应严格遵守56℃,30min的原则,并随时摇晃均匀。国产的各种系列胎牛血清国产的胎牛血清,国内没有严格意义的胎牛血清,胎牛血清本身是需要穿刺取血的,而国内都是剖腹产出胎牛,8小时左右取血,然后,进行过滤分装。所以,国产的胎牛血清不是严格意义的胎牛血清。不过也很多实验室使用,具体情况那就看实验的要求了。相同动物细胞代谢进程中有许多物质是动物细胞所必需而本身无法组成的的,例如碱基、氨基酸等微量物质。
除了对血清进行检测,有何更直观的方式分辨血清质量?目测法,我们可根据血清的颜色,沉淀,澄清度等进行区分。颜色:颜色根据血清蛋白含量的不同,可表现出黄色或者红色。进口血清质量比较好的呈现出淡黄、微红色,较差质量呈现出橘红色或鲜红色。热灭清或保存不当的,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纤维蛋白的凝聚产生。沉淀产生的原因很多,使用时反复冻融会增加沉淀。进口血清过滤分装前很少反复冻融,因此成品清澈。澄清度:进口血清是由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡。国产血清绝大多数为新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深。夏天在常温下即可,冬天要在20-30℃下静置30-45分钟。青岛新生牛血清厂家直销
注意:不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为这可能阻塞滤膜。青岛胎牛血清采购平台
用于使用敏感四环素诱导表达系统的细胞培养(Tet-on,Tet-off),以及其它对四环素敏感的实验中。6IR(辐照)钴60伽马辐照剂量在3.5Mrad.通过直接与间接作用将生物大分子(如核酸)键结破坏,人畜用药物/疫苗,及对微生物负荷(Bioburden)要求比较高水平的实验。7HI(热灭活)处理血清56℃,30Min,破坏补体,确保细胞与抗体结合不会发生裂解。8胚胎干细胞(ES)特用血清是从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,适用于人及小鼠胚胎干细胞、成体干细胞及原代细胞长期培养。9间充质干细胞(MSC)特用血清从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,经过骨髓,脂肪组织及脐带来源的间充质干细胞的细胞活性严格测试,通过传代及分化比例测试。 青岛胎牛血清采购平台
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