HI(热灭活)处理血清血清热灭活是通过提高血清温度到56℃,并保持该温度30Min完成,可以去除血清内补体,确保细胞与抗体结合不会发生裂解。加热可以灭活补体系统。焕活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,临沂牛血清生产厂家,细胞和血小板释放组胺,焕活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究中培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活于血清。胚胎干细胞(ES)特用血清是从多个批次的胎牛血清经过细胞培养及其他测试筛选出特定批号,临沂牛血清生产厂家,适用于人及小鼠胚胎干细胞、成体干细胞及原代细胞长期培养。间充质干细胞(MSC)特用血清从多个批次的胎牛血清筛选出特定批号,经过骨髓,脂肪组织及脐带来源的间充质干细胞的细胞活性严格测试,临沂牛血清生产厂家,通过传代及分化比例测试。新生小牛血清,简称 NBCS(Newborn Calf Serum),是从 20 天以下的牛身上获得的--云海生物。临沂牛血清生产厂家
按物种分类马血清10%马血清可代替FBS用于支持SRBC的体外抗体应答, 常与牛血清结合或单独作为哺乳动物细胞培养的补充培养基。猪血清猪血清在染色体研究中表现非常出色,可用于淋巴细胞培养, 疫苗生产(生产支原体), 中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV), 用于诱导大鼠肝纤维化, 作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考。兔血清正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照。在免疫组织化学和免疫细胞化学方面,各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂。猪血清厂家动物血清补偿根底培养基中没有或量缺少的营养成分。
瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量.
将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。如果在37℃或更高的温度解冻血清,血清中会出现沉淀。此沉淀可能包括磷酸钙结晶,但不改变血清的性能,同样血清热灭活也会导致沉淀的形成。浑浊和沉淀所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。某些外部因素可能引发纤维蛋白原转变为纤维蛋白,导致血清解冻后可能会观察到絮状物或混浊。这些物质的存在不会改变血清的性能。如果想去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装到无菌离心管中,以低速离心1~2min,上清液即可直接加入到培养基内使用。注意:不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为这可能阻塞滤膜。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。
⚑血清应如何保存?未拆封的血清应存放于-15至-20℃,避免反复冻融。拆封后的血清应无菌分装成一次的用量并存放于-15至-20℃,2~8℃溶解后建议尽快使用。⚑血清的有效期是多久?大部分血清效期是5年,针对每个批次,请通过质检文件确定具体效期日期。⚑血清应如何融解?取出的血清置于2~8℃融化,不时旋转混匀,充分融解后分装或使用。⚑为什么有时血清中出现絮状沉淀?是否需要去除?如何去除?多种原因可能导致絮状沉淀的形成,比较常见的原因之一是融化过程中,脂蛋白聚集所致。该现象一般不会影响产品质量。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般比较常用的是0.22umPES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。有些时候,根据实验需求,还要对血清进行一些特殊的加工。滨州马血清价格
至于某一株细胞适应什么样的血清浓度,还需要根据细胞特性、实验目的做测试和调校。临沂牛血清生产厂家
为什么存放于冰箱中的血清会出现沉淀?如何避免该现象?在2~8°C条件下存放,血清中的多种蛋白或脂蛋白会形成肉眼可见的沉淀,如血纤蛋白(fibrin),单体时处于溶解状态,在冻融过程中会发生聚集,形成肉眼可见的沉淀。但该现象一般不会影响血清的性能。可以400g离心5分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般比较常用的是0.22umPES材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。为尽量避免出现上述现象,建议血清分装成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反复冻融和融化后的血清在2~8°C条件下长时间放置。临沂牛血清生产厂家
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